ふき成長点培養苗のウイルスフリー化の確認

[要約］
　　生産現場のフキ「愛知早稲」は高率でCMVやBuＭＶに罹病している。これらの野外株の成長点を０．５〜０．８mmの大きさで切り出し、無機塩濃度を 1/2に減じたＭＳ培地で培養することにより、ウイルスフリー苗を育成できる。

生産環境研究所・生物資源部・生物工学研究室
果樹苗木分場・ウイルス無毒化研究室
［連絡先］　　０９２−９２４−２９７０
［部会名］　　生産環境
［専門］　　　 バイテク
［対象］　　　茎葉菜類
［分類］　　　普及

［背景・ねらい］
　　本県で栽培されているフキの主要品種「愛知早生」は三倍体で結実しないため、長年地下茎の分割による栄養繁殖が行われてきた。その結果、生産現場ではウイルスが原因と推察される症状が多発し、収量や品質の低下が見られる。このため、成長点培養により育成したウイルスフリー苗の導入が強く望まれている。そこで、これまでに成長点培養苗の大量増殖と馴化法及び低温保存法（平成５年度農業関係試験研究の成果）を明らかにした。
　　今回は、育成した成長点培養苗についてキュウリモザイクウイルス（ＣＭＶ）、フキモザイクウイルス（ＢｕＭＶ）、アルファルファモザイクウイルス（ＡＩＭＶ）及びアラビスモザイクウイルス（ＡｒＭＶ）を検定し、ウイルスフリー化の確認を行う。

［成果の内容・特徴］
�@生産現場のふきからは高率でＣＭＶ及びＢｕＭＶが検出される（表１）。

�A成長点を0.5〜0.8mmの大きさで切り出し、無機塩濃度を 1/2に減じたＭＳ培地で培養することにより、ＣＭＶ、ＢｕＭＶ、ＡｌＭＶ、ＡｒＭＶフリーの成長点培養苗を高率で育成することができる（表２）。

�BＣＭＶはＥＬＩＳＡ法、ＢｕＭＶはアカザを用いた生物検定法、ＡｌＭＶ及びＡｒＭＶはウエスタンブロット法により確認できる（表２）。

［成果の活用面・留意点］
�@ウイルスフリー苗は種苗増殖施設等を通じて生産現場へ供給する。

�AＣＭＶ、ＢｕＭＶ及びＡｌＭＶはアブラムシによって、ＡｒＭＶは線虫によって再感染するため、ウイルスフリー苗は３年毎に更新が必要である。

［具体的データ］

　　　　　　　表１　野外株のウイルス検定結果

　注）�@検定法　　ＣＭＶ：ＥＬＩＳＡ法　　ＢｕＭＶ：生物検定法

　表２　　成長点培養により育成された組織培養苗のウイルス検定結果

　注）�@生長点の大きさ：０．５〜０．８ｍｍ
　　　�A成長点培養の培地：無機塩濃度を１／２に減じたＭＳ、ショ
　　　　糖３％、ゲランガム０．２％、ＢＡ　０．１ｍｇ／ｌ，
　　　　ｐＨ５．８
　　　�B検定法ＣＭＶ，ＢｕＭＶ：表１の注に同じＡ１ＭＶ，
　　　　ＡｒＭＶ：ウェスタンプロット法
　　　�CＮ．Ｔ．：未検定、−：陰性、十：陽性もしくは擬陽性

　　図１　ＡｌＭＶのウエスタンプロットの結果
注）�@Ｎ．Ｃ．：ウイルスフリーのタバコ、
　　　Ｐ．Ｃ．：Ａ１ＭＶ感染タバコ
　　�A→のバンドがＰ．Ｃ．では確認されるが、
　　　その他のサンプルでは確認されない。

［その他］
研究課題名：フキの無病苗の育成
予算区分：経常 　
研究期間：平成 6年度（平成 4〜 6年） 　 　
研究担当者：古賀正明、平島敬太、中原隆夫、草野成夫、下村克己
発表論文等：平成４〜６年度生産環境研究所生物資源部試験成績概要書