福岡農総試研報１５（１９９６）
採卵鶏におけるアマニ油脂肪酸カルシウム給与が卵黄中脂肪酸組成に及ぼす影響
小島雄次＊．福原絵里子＊．津留崎正信＊．石田修三＊＊
（＊畜産研究所・＊＊太陽油脂株式会社）
α‐リノレン酸（Ｃ１８：３）を豊富に含むアマニ油脂肪酸カルシウム塩（アマニ油Ｃａ）を，産卵中の白色レグホーン種２０８羽を用いて０，２．５，５．０及び７．５％の４水準で給与した場合の，卵黄脂質中の脂肪酸組成及びｎ‐６系列とｎ−３系列多価不飽和脂肪酸の比（ｎ‐６／ｎ‐３比）に与える影響について調査した。また，飼料から摂取されたＣ１８：３の卵黄脂質への移行効率についても検討した。
卵黄脂肪酸中のＣ１８：３は給与割合の増加に伴って有意（ｐ＜０．０５）に増加し，対照区の０．２３％からそれぞれ３．１７，４．７７及び６．１３％となった。ドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６）の割合は，アマニ油Ｃａを給与することにより，対照区の１．６９％の１．３倍と有意（ｐ＜０．０５）に増加した。一方，リノール酸（Ｃ１８：２）はアマニ油Ｃａ給与に伴う影響は受けないが，アラキドン酸（Ｃ２０：４）は有意（ｐ＜０．０５）に減少した。ｎ‐６／ｎ−３比は，対照区の６．４２からそれぞれ２．２８，１．７３及び１．４８へ有意（ｐ＜０．０５）に減少した。また，卵黄中Ｃ１８：３量（Ｙ；ｍｇ）はアマニ油Ｃａ給与割合（Ｘ；％）を変数とする１次回帰式Ｙ＝３，４８７．０Ｘ＋４６．４（ｒ＝０．９８２５）で表すことができた。摂取されたＣ１８：３の卵黄への移行効率を考慮に入れると，アマニ油Ｃａ中のＣ１８：３を効率よく卵黄へ移行させるためには，２．５〜５．０％配合が適当であると考られた。
［キーワード：採卵鶏，アマニ油脂肪酸カルシウム塩，α‐リノレン酸，ドコサヘキサエン酸，ｎ‐６／ｎ−３比］
Effect of Linseed Oil Calsium Soap Consumption on the Fatty Acid
Composition of Yolk Lipid in Hens. KOJIMA Yuji, Eriko FUKUHARA, Masanobu
TSURUSAKI, and Shuzo ISHIDA (Fukuoka Agricultural Research Center, Chikushino,
Fukuoka 818, Japan) Bull. Fukuoka Agric. Res. Cent. 15:１０２-１０５(1996)
This experiment was conducted to study the effects of α-linoleic
acid (C18:3) and the ratios of n-6 to n-3 fatty acids (n-6/n-3) of yolk
lipid by feeding hens a formula diet which indicated 0, 2.5, 5.0, 7.5%
linseed oil calcium soap (LS). C18:3 content of yolk lipid increased significantly
(p＜0.05) from the control level of 0.23% to 3.17 (2.5%LS), 4.77 (5.0%LS)
and 1.48 (7.5%LS) respectively. The following single regression equation
was made for predicting the C18:3 in yolk (Y;mg) from diet LS levels (X;%):
Y=3,487.0X+46.4 (r=0.9825). It was concluded yjat the optimal level was
a commercial formula diet containing 2.5-5.0% LS in consideration of the
ratio of C18:3 in yolk to consumed.
[Key words: α-linoleic acid, layer, linseed oil calcium soap, ratio of
n-6/n-3 fatty acids]
緒 言
ヒトにおいて，必須脂肪酸の栄養的意義に関する指針については，ｎ‐６系列不飽和脂肪酸（ｎ‐６系列）のリノール酸（Ｃ１８：２）の摂取量と，摂取エネルギーに対する脂肪エネルギーの割合を中心とした指導７）がされてきた。近年，α‐リノレン酸（Ｃ１８：３）に代表されるｎ‐３系列不飽和脂肪酸（ｎ‐３系列）の栄養的，生理的側面で果たす役割について新しい知見７，１０）が得られ，注目され始めている。また，ｎ‐６系列とｎ−３系列の摂取バランスを指標とすることもヒトの健康保持のためには必要７）と，指摘され始めている。
一般に鶏卵の卵黄中の脂肪酸組成は，給与する飼料中の脂肪源の影響を受けやすい２，９）ことから，特定の脂肪酸を強化した鶏卵も市販されるようになってきた。
既報６）では，アマニ油を脂肪酸カルシウム塩（アマニ油Ｃａ）にけん化し，２．５〜７．５％の範囲で採卵鶏に長期間給与しても，産卵率及び産卵日量に影響を及ぼさず，採卵鶏に給与する飼料として実用上問題がないことを報告した。
そこで，本報告ではＣ１８：３を豊富に含むアマニ油Ｃａを採卵鶏に給与した場合の鶏卵卵黄中における各種脂肪酸構成割合に及ぼす影響，卵黄中のｎ‐６系列とｎ‐３系列の構成比（ｎ−６／ｎ‐３比）の変化及びＣ１８：３の卵黄への移行効率について検討したので報告する。
試 験 方 法
１ 供試鶏
供試鶏は既報６）と同様に１４８日齢の白色レグホーン種（ジュリア）２０８羽を，１区２６羽の２反復に分け，４５６日齢まで用いた。試験区はアマニ油Ｃａを２．５％（２．５％区），５．０％（５．０％区）及び７．５％（７．５％区）添加する区と無添加区（対照区）の合計４区とした。また，２．５％区よりも低い給与割合でのＣ１８：３の卵黄への移行効果をみるために，４１２日齢の白色レグホーン種１０羽を用いて，アマニ油Ｃａを１．０％給与する区（１．０％区）を設けた。基礎飼料には成鶏飼育用配合飼料（北九州くみあい飼料株式会社，ＣＰ１７％，２，８００Ｋｃａｌ／ｋｇ）を用いた。第１表に供試したアマニ油Ｃａを製造した時の原材料の混合割合と脂肪酸組成を示した。
２ 試料の分析
卵黄中の各脂肪酸は，アマニ油Ｃａの給与開始後３，７，２１，６０，１２０，１５０，１８０及び２７０日目に生産された卵を各試験区から無作為に３個抽出し，ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）を用いて測定した。卵黄をゆでた後，脱水し，Ｆｏｌｃｈら３）の方法に準じてクロロホルムメタノール（２：１，ｖ/ｖ）溶液で脂質を抽出した。この抽出液を１０ｍｌのエステル化反応用耐熱バイアルに移し，内部標準物質としてトリコサ酸メチルを一定量加えた。４０℃の温湯中で窒素気流下に溶媒を流去して十分に乾燥させた後，３フッ化ホウ素ナトリウムの１４％メタノール溶液１．０ｍｌとジクロロメタン０．５ｍｌを加えた。反応バイアル中を窒素ガスで置換し，ブロックヒーターで１時間１００℃に加熱してメチルエステル化を行った。反応終了後，直ちに氷冷し，飽和食塩水０．５ｍｌ及びｎ‐へキサン１．０ｍｌを加え，十分に振とう混合した。５分間静置した後にへキサン層を取り除き，無水硫酸ナトリウムで脱水し，ＧＣ分析用の試料とした。これを自動注入装置及び水素炎イオン型検出器付ＧＣ（ヒューレットパッカード社，Ｈｐ−５８９０U型）に１．０μｌ注入した。ＧＣの条件
は，カラムオーブン温度が２１０℃の恒温，キャリヤーガスとしてヘリウムを３０ｍｌ／分，スプリット比が１／１００であり，キャピラリーカラムは，ｏｍｅｇａｗａｘ‐２５０，０．２５ｍｍφ，３０ｍ（スペルコ社）を用いた。
脂肪酸メチルの同定は標準品のリテンションタイムを用いて行い，クロマトグラムの各ピーク面積比はインテグレーター（ヒューレットパッカード社，ＨＰ‐３３９６シリーズU型）により計算した。
測定した各脂肪酸は，卵黄中の総脂肪酸に占める割合で示した。
結 果
１ 卵黄中脂肪酸組成
第１表に示したとおりアマニ油中のＣ１８：３合量が５４．８％，アマニ油Ｃａ製造によるアマニ油混合割合が７４．０％であったことから，アマニ油Ｃａ中のＣ１８：３含量は４０．６％となった。
第２表に給与開始後２１日目以降，６０，１２０，１５０，１８０及び２７０日目の計６回調査した卵黄中の各脂肪酸組成の平均値とｎ‐６／ｎ‐３比の変化を示した。卵黄中のｎ‐３系列のＣ１８：３はアマニ油Ｃａの給与量の増加に伴って有意（ｐ＜０．０５）に増加し，対照区の０．２３％に対して，２．５％区，５．０％区及び７．５％区でそれぞれ約１４倍，約２１倍及び約２７倍となった。ドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６）は対照区１．６９％の約１．３倍と有意（ｐ＜０．０５）に増加したが，給与量に伴った増加は認められなかった。
一方，ｎ‐６系列のＣ１８：２はアマニ油Ｃａ給与により影響を受けなかったが，アラキドン酸（Ｃ２０：４）は対照区１．７４％の約０．５５倍に有意（ｐ＜０．０５）に減少する結果となった。飽和脂肪酸であるパルミチン酸（Ｃ１６：０）は給与量に伴って有意（ｐ＜０．０５）に滅少したが，ステアリン酸（Ｃ１８：０）には影響を及ぼさなかった。また，一価不飽和脂肪酸であるパルミトレン酸（Ｃ１６：１）は５．０％以上給与した場合に，オレイン酸（Ｃ１８：１）は７．５％給与した場合に対照区と比較して有意（ｐ＜０．０５）に減少した。
不飽和脂肪酸と飽和脂肪酸の構成比（Ｕ／Ｓ比）は，飽和脂肪酸のうちＣ１６：０が減少し，不飽和脂肪酸のうちＣ２０：４が減少したもののＣ１８：３及びＣ２２：６が増加したために，対照区の１．６９から各試験区とも約１．７７へと有意（ｐ＜０．０５）に増加した。不飽和脂肪酸の中でｎ‐６／ｎ‐３比は，ｎ‐６系列のＣ１８：２はアマニ油Ｃａ給与による変動がなく，Ｃ２０：４が減少し，ｎ−３系列のＣ１８：３及びＣ２２：６が著しく増加したために，対照区の６．４２から各区それぞれ２．２８，１．７３及び１．４８と有意（ｐ＜０．０５）な減少を示した。
２ Ｃ１８：３の経時釣変化と卵賞への移行効率
第１図にアマニ油Ｃａ給与による卵黄中Ｃ１８：３の構成割合の経時的変化を示した。卵黄中Ｃ１８：３は給与開始３日目以降から増加し，２１日日以降でほぼ一定となり，それ以降各試験区とも増加することはなかった。
第３表に１日当たりのＣ１８：３摂取量の卵黄脂質への移行効率（Ｃ１８：３移行効率）を示した。このとき，飼料から摂取したＣ１８：３の鶏体内におけるＣ２２：６への変換率が測定できなかったため，正確な移行効率ではないが，ここでは摂取されたＣ１８：３は１００％Ｃ１８：３として卵黄へ移行するものとして計算した。第１表に示したアマニ油Ｃａ中のＣ１８：３量と各試験区の飼料摂取量から求められたＣ１８：３摂取量は，１．０％区の０．３７ｇと比較して２．５％区，５．０％区及び７．５％区ではそれぞれ３．１，６．２及び９．０倍となった。また，各試験区とも卵黄中の全脂質含量は２８％程度（データ未発表）と比較的一定で，アマニ油Ｃａ給与量の増加に伴う卵黄脂質割合に変化は認められなかった。このため，卵黄脂質量と脂肪酸構成割合から計算した卵黄中Ｃ１８：３量は，アマニ油Ｃａの給与に伴い有意（ｐ＜０．０１）に増加し，１.０％区と比較してそれぞれ２.５，３.８及び６.５倍となった。しかし，卵黄中Ｃ１８：３量の増加率よりも摂取量の増加率の方が大きかったために，Ｃ１８：３移行効率は有意（ｐ＜０．０１）に減少した。
第２図に卵黄中に移行したＣ１８：３量と給与したアマニ油Ｃａの給与割合の関係を示した。このとき，卵黄中Ｃ１８：３量と飼料へのアマニ油Ｃａ配合割合との間に，有意（ｐ＜０．０１）な相関が認められ，卵黄中のＣ１８：３量（Ｙ；ｍｇ）は飼料中のアマニ油Ｃａ配合割合（Ｘ；％）を変数とする１次回帰式Ｙ＝３，４８７．０Ｘ＋４６．４（ｒ＝０．９８２５）で表すことができた。
考 察
ｎ‐６系列及びｎ‐３系列の必須脂肪酸に関するヒトの栄養については，ｎ−６系列特にＣ１８：２の摂取量と，摂取した不飽和脂肪酸と飽和脂肪酸の比を中心として論議されてきた。この理由としては，健康なヒトではｎ−３系列脂肪酸が欠乏した食品を長期間摂取し続けても病的状態にいたることが少ないということがあげられる。しかし，ここ数年の間にＣ１８：２の過剰摂取によるガン化１，７，１０）アレルギー疾患７，１０）や特定疾患の症状悪化が促進４，７，８，１０）されるなどの弊害が指摘されるようになり，これに代わってｎ‐６／ｎ‐３比やＣ１８：３の摂取量を中心とした新しい栄養指針についての研究が行われるようになった。ヒトが摂取するｎ‐６／ｎ‐３比は生体内脂質のｎ‐６／ｎ一３比に影響を及ぼし，各種エイコサノイドを通じて，あらゆる組織細胞の生理に強く影響する１０）とされ，奥山ら７）はｎ‐３／ｎ‐６摂取比を１．０以上にするのが適当であろうと提案している。また，ヒトにとって最適な食品からのｎ−３系列脂質摂取量は，１日当たりのＣ１８：３の摂取量として３００〜９９０ｍｇ１，８），摂取エネルギー当たりに換算すると０．５〜１．０％
程度１，４）が望ましいとの報告もある。
Ｃ１８：３を豊富に含むアマニ油Ｃａを採卵鶏に給与した場合，卵黄中の脂肪酸組成に変化が認められ，給与飼料の脂肪酸割合の影響を強く受け，Ｃ１８：３及びＣ１８：３の代謝物であるＣ２２：６が増加し，Ｃ２０：４が減少する結果を示した。また，測定した脂肪酸を飽和脂肪酸，１価不飽和脂肪酸，ｎ−６系列不飽和脂肪酸に分けると，影響を受けるＣ１６：０，影響を受けないＣ１８：２，１価不飽和脂肪酸ではＣ１６：１，Ｃ１８：１とも減少する結果を示した。特に，Ｃ１８：２はアマニ油Ｃａ給与によって全く影響されないが，Ｃ１８：２の代謝物であるＣ２０：４は有意に減少するという特徴があった。Ｃ１８：２が給与飼料の脂肪酸組成に影響を受けず一定の値を示す要因は明らかにできないが，高Ｃ１８：２合有飼料を給与した場合においても卵黄中のＣ１８：２の構成割合は影響を受けなかったとする報告５）も考慮に入れると，採卵鶏ではＣ１８：２を一定にする生理的要因があるものと考えられる。また，ｎ−６系列代謝物であるＣ２０：４はｎ−３系列の代謝物であるＣ２２：６とは全く逆の変化を示している。ＪｌＡＮＧら５）は給与したＣ１８：２やＣ１８：３は主にトリ
グリセライドに取り込まれ，その代謝物は主にリン脂質に取り込まれたとしており，またそのりン脂質への取り込み作用はｎ−３系列とｎ‐６系列とでは競合的関係にあると報告している。このことから，Ｃ１８：３を多く合む飼料を給与した場合，Ｃ１８：３とその代謝物であるＣ２２：６を増加させ，Ｃ１８：３の代謝物のリン脂質への取り込みの競合性からＣ２０：４はＣ２２：６とは逆に減少するものと考えられる。アマニ油Ｃａ給与によるＵ／Ｓ比の増加は，Ｃ２２：６＋Ｃ２０：４が変わらないため，主にＣ１８：３の増加によるものと考えられる。一方，ｎ−６／ｎ‐３比はＣ１８：３の増加に加えＣ２２：６とＣ２０：４が相反する変化をすることから，著しく減少したものと考えられる。これらのことから，アマニ油Ｃａの給与は，卵黄中のＣ１８：３を増加させ，ｎ‐６／ｎ-３比を減少させることが明らかとなった。
飼料資源としてアマニ油Ｃａを利用する場合に，どの程度添加したら良いかか問題である。本試験において，アマ二油Ｃａの給与量と卵黄中Ｃ１８：３量の関係は正の１次回帰式で表すことができ，ｎ‐６／ｎ‐３比はアマニ油Ｃａの給与により低下し，Ｃ１８：３移行効率はアマニ油Ｃａ７．５％給与で１０％以下に低下することが明らかとなった。また，アマニ油Ｃａを本試験と同様に採卵鶏に給与した試験６）では，産卵率及び平均卵重に及ぼす影響は小さく，２．５％給与が若干良くなる傾向を示していた。これらのことから，養鶏経営の中で卵黄にＣ１８：３を多く合む付加価値の高い鶏卵を生産しようとする場合，産卵性能を低下させずに効率よくＣ１８：３を卵黄に蓄積させ，しかもｎ−６系列とｎ‐３系列のバランスの良い鶏卵を生産させるアマニ油Ｃａの配合割合は，２．５％程度が適当であり，５．０％が限界であると考られた。
引 用 文 献
１）ＫＲｌＳＴｌＡＮ，Ｂ．Ｓ，Ｓ．ＦｌＳＣＨＥＲ，Ｆ．ＷＡＭＭＥＲ，ａｎｄ Ｔ．ＥＧＥＬＡＮＤ（１９８９）α−Ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ ａｃｉｄ ａｎｄ ｌｏｎｇ‐ｃｈａｉｎ ω−３ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｒｅｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ω−３ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ： ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｐｌａｓｍａ ａｎｄ ｒｅｄ ｃｅｌｌ ｌｉｐｉｄｓ，ａｎｄ ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ． Ａｍ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｎｕｔｒ．４９：２９０−３００
２）ＧＥＥＴＨＡ，Ｃ，ａｎｄ Ｊ．ＳｌＭ（１９９２）Ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ ａｃｃｕｍｍｕｌａｙｉｏｎ ｏｆ ｎ−３ ｆａｔｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ ｏｆ ｃｈｃｋｓ ｆｒｏｍ ｅｇｇｓ ｅｎｒｉｃｈｅｄ ｗｉｔｈ ｎ−３ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ．Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｓｃｉ．７１：１６５８−１６６８
３）ＦＯＬＣＨ，Ｊ．，Ｍ．ＬＥＥＳ ａｎｄ Ｇ．Ｈ．Ｓ．ＳＴＡＮＬＥＹ（１９５６） Ａ ｓｉｍｐｌｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｌｉｐｉｄｓ ｆｒｏｍ ａｎｉｍａｌ ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２２６：４９７−５０９．
４）ＨＯＬＭＡＮ，Ｔ．Ｒａｌｐｈ，Ｓ．Ｂ．ＪＯＨＮＳＯＮ，ａｎｄ Ｔ．Ｆ．ＨＡＴＣＨ（１９８２） Ａ ｃａｓｅ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ ａｃｉｄ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ．Ａｍ Ｊ Ｃｌｉｎ Ｎｕｔｒ．３５：６１７−６２３．
５）ＪｌＡＮＧ，Ｚ．，Ｄ．Ｕ．ＡＨＮ，ａｎｄ Ｊ．Ｓ．ＳｌＭ（１９９１）Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｆｅｅｄｉｎｇ ｆｌａｘ ａｎｄ ｔｗｏ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ ｓｅｅｄ ｏｎ ｆａｔｔｙ ａｃｉｄｓ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｙｏｌｋ ｌｉｐｉｄ ｃｌａｓｓ．Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｓｃｉ．７０：２４６７−２４７５．
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